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工具酶介紹

2015-10-23 12:01 醫(yī)學教育網
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工具酶介紹:

工具酶作為試劑用于測定化合物濃度或酶活力的酶稱為工具酶。

1.NAD(P)+或NAD(P)

H偶聯的脫氫酶及其指示反應最常作為工具酶的脫氫酶是乳酸脫氫酶(LD)、蘋果酸脫氫酶(MD)、谷氨酸脫氫酶(GLD)和6-磷酸葡萄糖脫氫酶(C-6-PD)。前兩種酶主要以NAD+或NAD為輔酶醫(yī)|學教育網搜集整理,GLD可以NAD+或NAD(P)+或其還原型為輔酶。NADH和NAD(P)H在340nm有特征性光吸收,可借此用分光光度計檢測,還可通過熒光法及化學發(fā)光法測定。

2.偶聯H202的工具酶及其指示反應

葡萄糖氧化酶、尿酸酶、甘油氧化酶、膽固醇氧化酶等工具酶分別用于葡萄糖、尿酸、甘油、膽固醇的測定,可使相應底物被氧化,生成H202,H2 02可通過下列指示反應來檢測。

(1)使單一的色素原顯色:色素原是一種無色的色素前身,在過氧化物酶(POD)存在下被H202氧化后可生成有色的色素。如鄰聯茴香胺(ODA)。

(2)使成對的色素原顯色:必須有兩個色素原共同存在,再在過氧化物酶(POD)的催化下生成色素。如酚和4-氨基安替比林作用,生成紅色色素。

(3)發(fā)光反應:H2O2也可用化學發(fā)光反應來監(jiān)測。

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