方法名稱： 銀杏葉提取物－萜類內(nèi)酯的測(cè)定－高效液相色譜法

應(yīng)用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測(cè)定銀杏葉提取物中萜類內(nèi)酯的含量。

本方法適用于銀杏葉經(jīng)加工制成的提取物。

方法原理： 本品加乙酸乙酯提取，合并提取液回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状既芙?，搖勻，濾過，續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)，計(jì)算出其含量。

試劑： 1. 甲醇

2. 正丙醇

3. 四氫呋喃

4. 2%鹽酸溶液

5. 乙酸乙酯

6. 5%醋酸鈉溶液

儀器設(shè)備： 1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按白果內(nèi)酯峰計(jì)算應(yīng)不低于2500。

1.3 蒸發(fā)光散射檢測(cè)器

2色譜條件

2.1流動(dòng)相：正丙醇 四氫呋喃 水=1 15 84

2.2柱溫：室溫

試樣制備： 1. 稱取供試品

精密稱定本品0.15g，為供試品。

2. 對(duì)照品溶液的制備

分別精密稱取白果內(nèi)酯對(duì)照品、銀杏內(nèi)酯A對(duì)照品、銀杏內(nèi)酯B對(duì)照品和銀杏內(nèi)酯C對(duì)照品適量，加甲醇制成每1mL各含2mg、1mg、1mg、1mg的混合溶液；或精密稱取已標(biāo)示白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C含量的銀杏葉對(duì)照提取物0.15g，照供試品溶液的制備方法，同法制成對(duì)照提取物溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品約0.15g，精密稱定，加水10mL，置水浴中溫?zé)崾谷苌ⅲ?%鹽酸溶液2滴，用乙酸乙酯振搖提取4次（15 mL，10 mL，10 mL，10 mL），合并提取液，用5%醋酸鈉溶液20 mL洗滌，分取醋酸鈉液，再用乙酸乙酯10 mL洗滌。合并乙酸乙酯提取液及洗液，用水洗滌2次，每次20 mL，分取水液，用乙酸乙酯10 mL洗滌，合并乙酸乙酯液，回收溶劑至干，殘?jiān)眉状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至5 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液。

操作步驟： 分別精密吸取對(duì)照品溶液（或?qū)φ仗崛∥锶芤海?mL、10mL，供試品溶液各5~10mL，注入高效液相色譜儀，用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器測(cè)定白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C，計(jì)算出其含量。