取本品約2g，精密稱定，置分液漏斗中，加乙醚30ml，振搖使基質(zhì)溶解后，用鹽酸液(0.1mol/L)提取3次，每次10ml，合并提取液，置100ml量瓶中。加磷酸鹽緩沖液(pH6.0)稀釋至刻度,照抗生素微生物檢定法測定(中國藥典1985年版二部附錄95頁)。

1,000鹽酸四環(huán)素單位相當于1mg的C22H24N2O8·HCl。