丹皮酚的測定—高效液相色譜法

　　應用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測定桂枝茯苓丸中丹皮酚的含量。

　　本方法適用于中成藥桂枝茯苓丸。

　　方法原理： 供試品于容量瓶中，加甲醇超聲提取，放冷，搖勻，得供試品溶液進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長274nm處檢測丹皮酚的吸收值，計算出其含量。

　　試劑： 甲醇（色譜純）

　　儀器設備： 1儀器

　　1.1高效液相色譜儀

　　1.2色譜柱

　　YGW-C18（4.6mm×250mm，10μm）

　　1.3紫外吸收檢測器

　　2色譜條件

　　2.1流動相：甲醇 水 = 60 40

　　2.2檢測波長：274nm

　　2.3柱溫：35℃

　　2.4流速：0.8mL/min

　　試樣制備： 1.稱取供試品

　　取桂枝茯苓丸（研細）0.3g，精密稱定。

　　2.對照品溶液的制備

　　精密稱取一定量的丹皮酚對照品，用重蒸水分別制成25.04、50.08、75.12、100.16、150.24、250.4μg/mL對照品溶液。

　　3.供試品溶液的制備

　　將供試品置50mL容量瓶中，加適量甲醇超聲處理1小時，放冷至室溫，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

　　注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

　　操作步驟： 1.標準曲線繪制

　　將上述系列標準濃度的對照品溶液，各進樣10μL，以峰面積積分值對濃度進行回歸，繪制標準曲線。

　　2.供試品溶液的測定

　　分別精密吸取上述對照品溶液50.08μg/mL與供試品溶液各10μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長274nm處測定丹皮酚的峰面積積分值，用外標法計算出丹皮酚的含量。