1.研究M3受體激動劑毛果蕓香堿對離體大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用

方法：采用Langendorff灌注系統(tǒng)，建立離體大鼠心肌缺血再灌注損傷模型.觀察毛果蕓香堿5μmol·L-1對復(fù)灌后冠脈流量、心肌丙二醛（MDA）含量、心肌超氧化物歧化酶(SOD）活性和心肌梗死面積的影響.結(jié)果 毛果蕓香堿改善缺血再灌注后的冠脈流量，其中5 min(P<0.01）和10min(P<0.05）的冠脈流量增加顯著；降低心肌MDA含量（P<0.05）并提高心肌SOD活性（P<0.05）；縮小心肌梗死面積（P<0.05).上述作用可被選擇性M3受體阻斷劑4-diphenylacetoxy-N-methylpiperidine-methiodide(4-DAMP)3 nmol·L-1所逆轉(zhuǎn).結(jié)論：M3受體激動劑毛果蕓香堿通過激動心肌M3受體而對離體大鼠心肌缺血再灌注損傷起保護作用.

2.探討長期應(yīng)用毛果蕓香堿對兔眼角膜內(nèi)皮細胞有無影響及影響方式。

方法：用2%的毛果蕓香堿給兔滴眼1個月和3個月后，取下兔眼球迅速固定，分離角膜內(nèi)皮組織，用蛋白印跡（Western?blot）法檢測兔眼角膜內(nèi)皮細胞中抗凋亡基因bcl?2蛋白及凋亡基因bax蛋白的表達，流式細胞儀檢測角膜內(nèi)皮細胞的凋亡率，透射電鏡下觀察各組角膜內(nèi)皮細胞的超微結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果：應(yīng)用毛果蕓香堿1個月及3個月后，均呈現(xiàn)兔眼角膜內(nèi)皮細胞凋亡基因bax蛋白表達增多，抗凋亡基因bcl?2蛋白表達減少，3個月組兔眼角膜內(nèi)皮細胞凋亡率高于對照組（P<0.05），透射電鏡下觀察可見，1個月及3個月組細胞內(nèi)空泡形成，線粒體腫脹，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張，細胞核固縮，染色質(zhì)固縮周邊化等典型凋亡改變。結(jié)論：長期應(yīng)用2%的毛果蕓香堿可以誘導(dǎo)兔眼角膜內(nèi)皮細胞發(fā)生凋亡。

3.對比研究1%毛果蕓香堿脂質(zhì)體滴眼液與1%毛果蕓香堿滴眼液對兔眼的縮瞳作用。

方法； 家兔18只，隨機分為實驗組、陽性對照組、陰性對照組。實驗組應(yīng)用1%毛果蕓香堿脂質(zhì)體滴眼液，陽性對照組應(yīng)用1%毛果蕓香堿滴眼液，陰性對照組應(yīng)用空白脂質(zhì)體滴眼液。各組家兔左眼滴人滴眼液，右眼滴人生理鹽水作為空白對照，分別在給藥前。給藥后0．25、0．5、1、2、3、4、5、7h測量瞳孔直徑。結(jié)果 :3組滴藥前瞳孔直徑左右眼比較，差異無顯著性（P>0．05）。滴藥后0．25h，陽性對照組縮瞳作用最大（P<0．01），滴藥1h瞳孔開始散大，滴藥后5h差異無顯著性（P>0．05）；實驗組滴眼后0．5h瞳孔最?。≒<0．01），3h瞳孔開始散大，7h差異無顯著性（P>0．05）；陰性對照組在觀察的7h內(nèi)無差異（P>0．05）。結(jié)論：1%毛果蕓香堿脂質(zhì)體滴眼液具有緩慢釋藥，延長作用時間的優(yōu)點。

4.對2%毛果蕓香堿微乳滴眼劑與2%毛果蕓香堿滴眼液在兔房水中的藥代動力學(xué)進行對比研究。

方法：健康白兔60只，隨機分成20組，10個實驗組，10個對照組，每組3只兔（6只眼）。對各實驗組雙眼結(jié)膜囊內(nèi)準(zhǔn)確滴入2%毛果蕓香堿微乳滴眼劑50 μl，對各對照組雙眼同法滴入2%毛果蕓香堿滴眼液50 μl，分別于給藥后5、10、30、40、60、90、120、180、240及360 min時抽取房水。用二氯甲烷提取房水中的藥物，采用反相高壓液相色譜（high pressure liquid chromatography,HPLC）法測定房水中的藥物濃度。結(jié)果： 用反相HPLC法可以將毛果蕓香堿與其它雜質(zhì)分離，最低檢測濃度為0.01 mg/L。2%毛果蕓香堿微乳滴眼劑或滴眼液50 μl滴眼后，除5 min時間點外，其余各時間點毛果蕓香堿微乳滴眼劑治療組的房水藥物濃度較毛果蕓香堿滴眼液治療組明顯增高（P=0.000 3～0.042）。微乳滴眼劑的藥-時曲線下面積是滴眼液的3倍，微乳滴眼劑的生物利用度比滴眼液高2倍。用微乳滴眼劑后6 h，房水中仍可測出毛果蕓香堿的濃度，而用滴眼液后3 h，房水中已測不出毛果蕓香堿的濃度。結(jié)論： 將毛果蕓香堿滴眼液的劑型改為微乳滴眼劑可明顯提高毛果蕓香堿的生物利用度，增強療效，減少用藥頻率，提高青光眼的治療指數(shù)，具有較好的應(yīng)用前景。