【提問】檢測IgE含量常用的簡單方法是什么？

請問，什么情況下用單向免疫擴散法，什么情況下用ELISA法。

【回答】學(xué)員gdlj2011，您好！您的問題答復(fù)如下：

單向免疫擴散法：在含有特異抗體的瓊脂板中打孔，并在孔中加入定量的抗原，當(dāng)抗原向周圍擴散后與瓊脂中抗體相結(jié)合，既形成白色沉淀環(huán)，其直徑或面積與抗原濃度呈正相關(guān)。同時用標(biāo)準(zhǔn)抗原或國際參考蛋白制成標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可用以定量檢測未知標(biāo)本的抗原濃度（mg/ml或IU/ml）。

應(yīng)用這一實驗方法可檢測正常人群或患者血清中IgG、IgA及IgM的含量及正常值醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。

酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)：是酶免疫測定技術(shù)中應(yīng)用最廣的技術(shù)。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體(聚苯乙烯微量反應(yīng)板)表面，使抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行，通過洗滌將固相上的抗原抗體復(fù)合物與液相中的游離成分分開。

由于該法具有特異性高、敏感性強、操作方便等優(yōu)點，目前已經(jīng)廣泛應(yīng)用。已經(jīng)有多種病毒的檢測試劑盒，如各型肝炎病毒、單純皰疹病毒、巨細(xì)胞病毒、EB病毒和HIV等。

(1)雙抗體夾心法：用于檢查特異抗原。將已知抗體包被在酶聯(lián)檢測板上(固相)，加入待檢標(biāo)本，標(biāo)本中若含有相應(yīng)抗原即與固相上的抗體結(jié)合，洗滌去除未結(jié)合成分，加入該抗原特異的酶標(biāo)記抗體，洗去未結(jié)合的酶標(biāo)記抗體，加底物后顯色。酶聯(lián)免疫測定法測定血清IgE時也常用雙抗體夾心ELISA法，操作方便，敏感性也很高，在臨床上經(jīng)常應(yīng)用。

(2)間接法：用于檢查特異抗體。用已知抗原包被固相，加入待檢血清標(biāo)本，再加酶標(biāo)記的二抗，加底物觀察顯色反應(yīng)。

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★問題所屬科目：公衛(wèi)執(zhí)業(yè)醫(yī)師---醫(yī)學(xué)免疫學(xué)