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以DNA損傷為檢測終點的致突變試驗是什么?

2012-05-28 08:51 來源:
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【提問】以DNA損傷為檢測終點的致突變試驗是什么?

【回答】學(xué)員bbyxy,您好!您的問題答復(fù)如下醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理:

程序外DNA合成試驗(UDS) 正常細(xì)胞在有絲分裂過程中,僅在S期進(jìn)行DNA復(fù)制合成。當(dāng)DNA受損后,DNA的修復(fù)合成可發(fā)生在正常復(fù)制合成期(S期)以外的其他時期,稱為程序外DNA合成(UDS)。用缺乏必需氨基酸精氨酸的培養(yǎng)基進(jìn)行同步培養(yǎng)將細(xì)胞阻斷于G1期,并用藥物(常用羥基脲)將正常的DNA半保留復(fù)制阻斷,然后用受試物處理細(xì)胞,并在加有3H-胸腺嘧啶核苷的培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng)。如果受試物引起DNA損傷,并啟動DNA損傷修復(fù)機制,培養(yǎng)液中的3 H-胸腺嘧啶核苷就會摻入到DNA鏈中。利用液閃或放射自顯影技術(shù)測定摻入DNA的放射活性,即可知道DNA修復(fù)合成的程度,從而間接反映DNA的損傷水平。

許多哺乳動物及人類細(xì)胞可用于UDS的檢測,常用的有:大鼠原代培養(yǎng)肝細(xì)胞,人成纖維細(xì)胞,人外周血淋巴細(xì)胞等。

祝您學(xué)習(xí)愉快!順利通過考試!

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