通過不斷稀釋使被分離的樣品分散到最低限度，然后吸取一定量注入平板與溫度適合溶化了的瓊脂培養(yǎng)基混合，這樣分散的細菌被固定在原處而形成單菌落。

　　（1）將大腸桿菌或酵母菌用無菌水制作菌懸液。

　?。?）取若干支無菌試管，每支內(nèi)盛9ml無菌水。

　?。?）吸取1ml制備好的菌懸液，置于第一支含有9ml無菌水的試管內(nèi)，這樣就稀釋了10倍，也就是10-2。

　?。?）從第一支試管內(nèi)（10-2）吸取1ml注入第二支含有無菌水的試管內(nèi)，這樣就稀釋了100倍，也就是10-2。

　?。?）用同樣方法操作，直至稀釋至10-5-10-6醫(yī)|學教育網(wǎng)搜集整理。

　?。?）分別精確吸取10-5-10-6各稀釋度菌液0.2ml加入編好號的空無菌平皿中，同一稀釋度重復(fù)做三個平皿。

　?。?）將已溶化并冷卻至45℃的瓊脂培養(yǎng)基倒入上述各平皿內(nèi)，輕輕旋轉(zhuǎn)使培養(yǎng)基與菌懸液充分混勻，凝固后倒置于37℃或38℃度恒溫箱中培養(yǎng)24-48小時，觀察平板上菌落生長和分布情況。