（1）操作前，先用75%酒精擦手，待酒精揮發(fā)后點(diǎn)燃酒精燈。

　　（2）將菌種管和斜面握在左手大姆指和其它四指之間，使斜面和有菌種的一面向上，并處于水平位置。

　　（3）先將菌種和斜面的棉塞旋轉(zhuǎn)一下，以便接種時(shí)便于拔出。

　?。?）左手拿接種環(huán)（如握鋼筆一樣），以火焰上先將環(huán)端燒紅滅菌，然后將有可能伸入試管其余部位也過(guò)火滅菌。

　?。?）用右手的無(wú)名指、小指和手掌將菌種管和待接斜面試管的棉花塞或試管帽同時(shí)拔出，然后讓試管口緩緩過(guò)火滅菌（切勿燒過(guò)燙）。

　?。?）將灼燒過(guò)的接種環(huán)伸入菌種管內(nèi)，接種環(huán)在試管內(nèi)壁或未長(zhǎng)菌苔的培養(yǎng)基上接觸一下，讓其充分冷卻，然后輕輕刮取少許菌苔，再?gòu)木N管內(nèi)抽出接種環(huán)。

　?。?）迅速將沾有菌種的接種環(huán)伸入另一支待接斜面試管醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。從斜面底部向上作“Z”形來(lái)回密集劃線。有時(shí)也可用接種針僅在培養(yǎng)基的中央拉一條線來(lái)作斜面接種，以便觀察菌種的生長(zhǎng)特點(diǎn)。

　?。?）接種完畢后抽出接種環(huán)灼燒管口，塞上棉塞。

　　（9）將接種環(huán)燒紅滅菌。放下接種環(huán)，再將棉花塞旋緊。