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前述的化學(xué)和物理方法都是通過傳染方式基因轉(zhuǎn)移。病毒介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移是通過轉(zhuǎn)換方式完成基因轉(zhuǎn)移,即以病毒為載體(vector),將外源目的基因通過基因重組技術(shù),將其組裝于病毒上,讓這種重組病毒去感染受體宿主細(xì)胞,這種病毒稱為病毒運(yùn)載體(viralvector)。目前應(yīng)用的有兩種病毒介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移方法。
反轉(zhuǎn)錄病毒載體:反轉(zhuǎn)錄病毒雖是RNA病毒,但有反轉(zhuǎn)錄酶,可使RNA轉(zhuǎn)錄為DNA,再整合到宿主細(xì)胞基因組。反轉(zhuǎn)錄病毒載體有以下的優(yōu)點(diǎn)首先是具有穿透細(xì)胞的能力,可使近100%的受體細(xì)胞被感染,轉(zhuǎn)化細(xì)胞效率高;其次,它能感染廣譜動物物種和細(xì)胞類型而無嚴(yán)格的組織特異性;再者隨機(jī)整俁的病毒可長期存留,一般無害于細(xì)胞,但也存在缺點(diǎn):這種載體只能把其DNA整合到能旺盛分裂細(xì)胞的染色體,而不適合于那些不能正常分裂的細(xì)胞,如神經(jīng)元。
最嚴(yán)重的問題是由于病毒自身含有病毒蛋白及癌基因,就有使宿主細(xì)胞感染病毒和致癌的危險性。因此,人們有目的地將病毒基因及其癌基因除去,僅留它們的外殼蛋白,以保留其穿透細(xì)胞的功能,試圖避免上述缺點(diǎn)。這種改造后的病毒稱為缺陷型病毒。這樣的病毒中的反轉(zhuǎn)錄酶可將RNA轉(zhuǎn)化為DNA,有助于該DNA順利進(jìn)入宿主細(xì)胞的基因組,而該病毒則死亡。由于病毒整合基因組是隨機(jī)的,所以還是可能激活細(xì)胞的原癌基因,以及因隨機(jī)插入發(fā)生插入突變醫(yī)學(xué)`教育網(wǎng)搜集整理。
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