(一)基本原理
速率散射比濁分析是一種動(dòng)力學(xué)測(cè)定方法,在一定條件下,抗原和相應(yīng)的抗體很快結(jié)合成抗原抗體免疫復(fù)合物顆粒,速率比濁法就是在一定時(shí)間內(nèi)抗原抗體結(jié)合過(guò)程中,測(cè)定二者結(jié)合的最大反應(yīng)速度,即反應(yīng)達(dá)頂峰峰值。所謂速率是抗原抗體結(jié)合反應(yīng)過(guò)程中,在單位時(shí)間內(nèi)兩者結(jié)合的速度。速率法是測(cè)定最大反應(yīng)速率,即在抗原抗體反應(yīng)達(dá)最高峰時(shí),通常為數(shù)十秒鐘,測(cè)定其復(fù)合物形成的量。峰值的高低在抗體過(guò)量情況下與抗原的量成正比。峰值出現(xiàn)的時(shí)間與抗體的濃度及其親和力直接相關(guān)。不同抗原含量其速率峰值不同,通過(guò)電腦處理,求出抗原含量。
(二)抗原過(guò)量檢測(cè)
真正的抗原過(guò)量檢測(cè)是為保證速率散射比濁分析檢測(cè)的準(zhǔn)確性和精確度,在Beckman公司的生產(chǎn)的ARRY360系統(tǒng)中,設(shè)計(jì)有抗原過(guò)量檢測(cè)系統(tǒng)。其原理是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)形成的濁度不斷增加而設(shè)計(jì)的。在抗體固定的情況下,免疫復(fù)合物的生成量隨抗原的增加而增加,當(dāng)抗原量超過(guò)抗體量時(shí),免疫復(fù)合物的量反而減少。根據(jù)這一原理,當(dāng)標(biāo)本中的抗原和反應(yīng)液中的抗體結(jié)合后,若反應(yīng)液中有未結(jié)合的抗體存在,再加入抗原時(shí),可見(jiàn)新的速率峰值信號(hào)。如果沒(méi)有游離的抗體存在,即抗原過(guò)剩的情況下,就不會(huì)有或者只有很小的新的速率信號(hào)出現(xiàn),儀器會(huì)重新對(duì)標(biāo)本進(jìn)行更高稀釋(1:6、1:36、1:216及1:1296等),然后進(jìn)行測(cè)定,使結(jié)果準(zhǔn)確可靠醫(yī)學(xué)教.育網(wǎng)搜集整理。
附:終點(diǎn)散射比濁法
其原理是讓抗原抗體作用一定時(shí)間,使其反應(yīng)達(dá)到平衡后,測(cè)定其復(fù)合物的量。復(fù)合物的濁度不再受時(shí)間的影響,但反應(yīng)復(fù)合物聚合產(chǎn)生絮狀沉淀之前(大約反應(yīng)數(shù)十分鐘)進(jìn)行濁度測(cè)定。敏感度達(dá)mg/L水平,可自動(dòng)化,但反應(yīng)時(shí)間較長(zhǎng)。
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