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考試輔導(dǎo)
取試管6支,其中3支各精密加入對照品溶液1ml,另3支各精密加入供試品溶液1ml,置37℃±0.5℃水浴中,保溫5分鐘,精密加入預(yù)熱至37℃±0.5℃的血紅蛋白試液5ml,搖勻,并準(zhǔn)確計(jì)時(shí),在37℃±0.5℃水浴中反應(yīng)10分鐘。立即精密加入5%三氯醋酸溶液5ml,搖勻,濾過,取續(xù)濾液備用。另取試管2支,各精密加入血紅蛋白試液5ml,置37℃±0.5℃水浴中保濕10分鐘,
再精密加入5%三氯醋酸溶液5ml,其中1支加供試品溶液1ml,另1支加上述鹽酸溶液1ml,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,分別作為供試品和對照品的空白對照,照分光光度法(附錄ⅣA)在275nm的波長處測定吸收度,算出平均值A(chǔ)S和A,按下式計(jì)算。
A×Ws×n 每1g含蛋白酶活力(單位)=As×W×10×181.19式中 AS為對照品的平均吸收度;A為供試品的平均吸收度;Ws為對照品溶液每1ml中含酪氨酸的量,μg;W為供試品取樣量,g;n為供試品稀釋倍數(shù)。
在上述條件下,每分鐘能催化水解血紅蛋白生成1μmol酪氨酸的酶量,為一個(gè)蛋白酶活力單位。