方法名稱： 靈芝子珍珠口服液—腺苷的測定—高效液相色譜法

應用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測定靈芝子珍珠口服液中腺苷的含量。

本方法適用于靈芝子珍珠口服液。

方法原理： 取供試品加甲醇，超聲處理，放置待沉淀完全，濾過，取許濾液蒸干，殘渣加水溶解，以水飽和的正丁醇提取，正丁醇提取液蒸干，殘渣加50%甲醇溶解并定容，搖勻，作為供試品溶液。注入高效液相色譜儀，以紫外檢測器檢測，檢測波長為260nm，記錄腺苷的響應值，計算其含量。

試劑： 1. 甲醇

2. 正丁醇

儀器設備： 1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

Hypersil C18 (250 ×4.6mm, 5μm)。

1.3紫外檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相： 甲醇 磷酸鹽緩沖液（pH 6.5） = 10 1

2.3 柱溫：30℃

2.4 檢測波長：260nm

2.5 流速：1.0mL/min

試樣制備： 1. 對照品溶液的制備

精密稱取腺苷對照品適量，加甲醇配制成1mL含40μg的對照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取供試品20mL置100mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻超聲處理5分鐘，放置待沉淀完全，濾過，取許濾液50mL蒸干，殘渣加水20mL溶解，以水飽和的正丁醇提取4次，合并正丁醇提取液蒸干，殘渣加50%甲醇溶解并定容至5mL，搖勻，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 1. 標準曲線的繪制

精密吸取上述對照品溶液2.0、4.0、6.0、8.0、10.0μL注入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外檢測器檢測器，于260nm檢測腺苷的吸收值，以腺苷的進樣量對其峰面積繪制標準曲線，進行線性回歸，得到回歸方程。

2. 供試品的測定

精密吸取上述供試品溶液10μL，注入高效液相色譜儀，以紫外檢測器檢測，檢測波長為260nm，記錄腺苷的響應值，計算其含量。