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【提問(wèn)】 關(guān)于重組DNA技術(shù)的敘述,錯(cuò)誤的是:
A.質(zhì)粒、噬菌體可作為載體
B.限制性?xún)?nèi)切酶是主要工具酶之
C.重組DNA由載體DNA和目標(biāo)DNA組成
D.重組DNA分子經(jīng)轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染可進(jìn)入宿主細(xì)胞
E.進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的重組DNA均可表達(dá)目標(biāo)蛋白 請(qǐng)老師講解.
【回答】答復(fù):重組DNA的表達(dá)
重組的DNA序列并不能保證相應(yīng)的蛋白的表達(dá)。
影響重組蛋白表達(dá)的因素很多:
1)你選用的的表達(dá)載體是否與你的宿主相匹配,如pReceiver-M01是在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)的,而pReceiver-B01則是在細(xì)菌里表達(dá)的。
2)如果表達(dá)的是一個(gè)膜蛋白,它是否需要在細(xì)胞內(nèi)定位的靶序列。
3)過(guò)量表達(dá)的蛋白對(duì)宿主是否存對(duì)表達(dá)宿主細(xì)胞有毒性作用?
4) 該蛋白質(zhì)是否正確折疊成有功能或者能適合免疫分析所需的三級(jí)結(jié)構(gòu)?
5)如果用一特異的單克隆抗體檢測(cè)蛋白表達(dá),最好做全長(zhǎng)ORF的DNA測(cè)序以確定你是否得到一個(gè)不同的ORF剪接體。
★問(wèn)題所屬科目:臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師---生物化學(xué)
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