ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測定）是一種常用的免疫學檢測方法，主要用于檢測樣本中特定抗原或抗體的存在和濃度。其基本原理是利用了抗原與抗體之間的特異性結合反應，并通過酶催化底物顯色來放大信號，從而實現(xiàn)對目標分子的定性或定量分析。

ELISA技術主要包括以下幾個步驟：
1. 包被：將已知的抗原（直接法）或者抗體（間接法、競爭法等）固定在固相載體表面，如微孔板。
2. 封閉：加入封閉液覆蓋未結合的位置，以減少非特異性吸附對結果的影響。
3. 加樣：向微孔中加入待測樣品，如果樣品中含有目標抗原或抗體，則會與包被物質發(fā)生特異性結合。
4. 洗滌：去除沒有結合的成分以及可能存在的干擾物。
5. 結合酶標二抗：對于間接法ELISA，需要添加能夠識別初級抗體并已經(jīng)標記了酶的二抗；直接法則省略此步驟。
6. 顯色反應：加入底物后，在酶的作用下產(chǎn)生顏色變化。根據(jù)顯色程度的不同可以判斷樣品中目標分子的含量。
7. 測定：使用分光光度計測定吸光值，從而計算出待測物質的具體濃度。

ELISA技術因其操作簡便、靈敏度高、特異性強等特點，在臨床診斷和科學研究領域得到了廣泛應用。