生物素標記蛋白質(zhì)的標記注意事項
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1.應根據(jù)抗原或抗體分子結(jié)構(gòu)中所帶可標記基團的種類(氨基、醛基或巰基)以及分子的理化性質(zhì)(酸性、中性或堿性),選擇相應的活化生物素和反應條件。
2.標記反應時,活化生物素與待標記抗原或抗體應有適當?shù)谋壤姑總€蛋白質(zhì)分子上標記的生物素分子數(shù)量控制在一定范圍,以免影響標記物的活性。
3.為減少生物素標記蛋白質(zhì)后,大分子物質(zhì)造成的空間位阻影響,有利于生物素與親和素的結(jié)合,可在生物素與被標記物間加入交聯(lián)臂樣結(jié)構(gòu)。
4.生物素與抗原、抗體等蛋白質(zhì)結(jié)合后,不影響后者的免疫活性;標記酶時則結(jié)果有不同。
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