蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)是指蛋白質(zhì)分子所帶正負(fù)電荷相等，凈電荷為零時(shí)溶液的pH值。在這一pH條件下，蛋白質(zhì)由于沒有凈電荷，在電場中不會(huì)發(fā)生遷移。測定蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)有多種方法，下面介紹幾種常見的技術(shù)：
1. 電泳法：利用不同蛋白質(zhì)在特定pH值下的移動(dòng)速度差異來確定其等電點(diǎn)。將樣品加入到含有梯度緩沖液的凝膠或薄層上，在電場作用下，每種蛋白質(zhì)會(huì)向與其自身所帶凈電荷相反的方向移動(dòng)，直到達(dá)到一個(gè)位置，此時(shí)它的正負(fù)電荷相等不再繼續(xù)遷移，這個(gè)位置對應(yīng)的pH值即為該蛋白的等電點(diǎn)。
2. 等電聚焦（Isoelectric Focusing, IEF）：這是一種特殊的電泳技術(shù)。在含有兩性電解質(zhì)載體的凝膠或溶液中形成連續(xù)的pH梯度，當(dāng)施加電壓時(shí)，蛋白質(zhì)分子會(huì)根據(jù)其自身所帶電荷情況向pH值接近自己等電點(diǎn)的方向移動(dòng)，最終停留在與其等電點(diǎn)相匹配的位置。
3. 溶解度測定法：由于在等電點(diǎn)附近，大多數(shù)蛋白質(zhì)的溶解度最低，因此可以通過改變?nèi)芤旱膒H觀察蛋白質(zhì)沉淀的程度來大致判斷其等電點(diǎn)。具體操作是將一定濃度的蛋白質(zhì)溶液逐步調(diào)整pH值，并記錄每步變化后的渾濁程度或沉淀量，當(dāng)出現(xiàn)最明顯沉降時(shí)所對應(yīng)的pH即為該蛋白的大致等電點(diǎn)。
4. 滴定法：通過向蛋白質(zhì)水溶液中逐漸加入酸或堿并同時(shí)監(jiān)測電導(dǎo)率的變化來確定其等電點(diǎn)。由于在接近等電點(diǎn)的區(qū)域，蛋白質(zhì)分子表面的可交換基團(tuán)開始失去或獲得質(zhì)子，導(dǎo)致體系電導(dǎo)率發(fā)生顯著變化，因此可以根據(jù)這種特性估算出等電點(diǎn)的位置。

以上方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，在實(shí)際應(yīng)用中可根據(jù)具體情況選擇合適的方法進(jìn)行測定。